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簡單介紹熒光濾光片的類型以及選取原則
點擊次數(shù):3750 更新時間:2022-09-06
熒光濾光片指的是應(yīng)用于熒光系統(tǒng)的濾光片,包括提取熒光能量或獲得熒光成像。它的主要特點是對干擾光的隔離度好,自發(fā)熒光干擾少。像PCR儀,熒光免疫分析儀,熒光顯微鏡等各種醫(yī)療分析和檢測儀器中都會用到熒光濾光片。它是應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)儀器的關(guān)鍵元件,主要作用是在熒光顯微光學(xué)系統(tǒng)中篩選激發(fā)光與發(fā)射光的特征波段光譜。
熒光濾光片按照帶通可以分為兩類:
(1)單通熒光片
比如典型的單通熒光濾鏡組,激發(fā)濾色片和發(fā)射濾色片都只有一個帶通(長通或短通),通常只激發(fā)和篩選及相近染料的熒光,在實際應(yīng)用中,單通濾片是常用到的。
(2)多通熒光片
是指激發(fā)濾色片和發(fā)射濾色片都具有多個帶通(長通或短通),可以同時激發(fā)DAPI、FITC和Texas Red。
在實際應(yīng)用中,多通濾片比較適合直接用眼睛觀察,如果用于成像很大機率會出現(xiàn)串色現(xiàn)象。
如果您有多個熒光濾光片組,就可以拍出多色熒光圖片了,隨之而來的重要問題就是——該如何選擇制樣時的多種染料?如何了解染料或者蛋白的激光和發(fā)射光波長?其實很簡單,在大家購買染料時說明書中會寫明相關(guān)的激發(fā)光和發(fā)射光波長。
熒光濾光片組的選取原則是:在成像端盡可能讓熒光(發(fā)射光)透過,同時防止其他熒光串色,以獲得更好的信噪比。在實際應(yīng)用中,大家可以根據(jù)實驗需要提前和技術(shù)人員充分溝通后,獲得更佳的匹配方案。需要注意的是:濾色鏡組一般放在熒光轉(zhuǎn)盤內(nèi),因此也一般不會出問題,切記不要拆下來自己擦拭,更不要粘上指紋,這樣會影響熒光透過率。
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